OC-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432551

Visão geral

Onecut2 (OC-2) é um fator de transcrição homeobox de camundongo que coordena a especificação do destino celular e a padronização (patterning) de tecidos durante o desenvolvimento, com papéis de destaque na neurogênese e na diferenciação de órgãos. Ao se ligar a elementos regulatórios de DNA, o OC-2 modula programas transcricionais que se intersectam com redes determinantes de linhagem que controlam a proliferação, a diferenciação e a identidade regional. A atividade da família Onecut contribui para a manutenção da identidade celular e a maturação em múltiplos contextos epiteliais e neuronais. A expressão desregulada de ONECUT2 tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a circuitos transcricionais oncogênicos em diversos tipos de tumor, sustentando sua utilidade como um nó mecanístico em estudos de biologia do desenvolvimento e do câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OC-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Onecut2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Onecut2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Onecut2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OC-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Onecut2 para a investigação da sinalização de OC-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Onecut2 críticos para a função OC-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Onecut2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OC-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo OC-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Onecut2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OC-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR OC-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Onecut2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Onecut2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.