Nrf2双切口酶质粒(m): sc-421869-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Nrf2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Nrf2双切酶质粒（m）和Nrf2双切酶质粒（m2）编码针对Nfe2l2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Nrf2双切口酶质粒(m) | sc-421869-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nrf2双切口酶质粒(m2) | sc-421869-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Nfe2l2 基因编码 Nrf2，这是一种 bZIP 转录因子。Nrf2 通过结合抗氧化反应元件（AREs），诱导解毒、氧化还原调控以及蛋白质稳态相关基因的表达，从而协调细胞对亲电性与氧化应激的防御。在基础条件下，Nrf2 的活性受到 KEAP1 依赖的泛素化及蛋白酶体降解所抑制；而在应激信号作用下，Nrf2 得到稳定化，从而重塑谷胱甘肽代谢、NADPH 再生以及外源性物质清除等通路的转录程序。Nrf2 信号还与炎症与代谢网络相互交织，包括与 NF-κB 的串扰及对线粒体稳态的影响，从而塑造机体对环境与内源性应激源的适应性反应。KEAP1–Nrf2 轴的失调与多种疾病模型相关，包括致癌过程、慢性炎症状态、神经退行性变以及代谢功能障碍，因此 Nfe2l2 常被用作研究应激耐受与氧化还原生物学机制的靶点。
Nrf2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Nfe2l2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nfe2l2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Nfe2l2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Nfe2l2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。