NPY4-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406230

Visão geral

NPY4R codifica o receptor Y4 do neuropeptídeo Y (NPY4-R), um GPCR acoplado a Gi/o ativado preferencialmente pelo polipeptídeo pancreático, que modula a sinalização de cAMP, a atividade de canais iônicos e as vias MAPK/ERK a jusante. O NPY4-R é expresso em tecidos periféricos e em regiões selecionadas do SNC, conectando sinais neuroendócrinos à regulação do comportamento alimentar, do balanço energético, da motilidade gastrointestinal e do controle autonômico. A ativação do receptor influencia a excitabilidade celular e programas secretórios por meio da inibição da adenilil ciclase e da sinalização mediada por subunidades βγ. Alterações na sinalização de NPY4R têm sido estudadas no contexto da fisiologia metabólica, de características associadas à obesidade e da regulação funcional gastrointestinal, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para investigar circuitos homeostáticos dirigidos por neuropeptídeos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NPY4-R (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NPY4R em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NPY4R, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NPY4R na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NPY4-R.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NPY4R para a investigação da sinalização de NPY4-R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NPY4R críticos para a função NPY4-R
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NPY4R para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NPY4-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NPY4-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NPY4R. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NPY4-R Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NPY4-R (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NPY4R para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NPY4R definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.