NPY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401098
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NPY O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NPY, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NPY Anticorpo (F-6): sc-133080
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NPY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401098 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O neuropeptídeo Y (NPY) codifica um neuropeptídeo secretado de 36 aminoácidos que sinaliza por meio de receptores Y acoplados à proteína G para regular a neurotransmissão, a secreção neuroendócrina e o controle autonômico do equilíbrio energético. A atividade do NPY se acopla à sinalização mediada por Gi/o para modular os níveis de cAMP, os fluxos de cálcio e vias de quinases a jusante que influenciam a excitabilidade neuronal, a plasticidade sináptica e os circuitos relacionados ao apetite. Além do sistema nervoso central, o NPY contribui para respostas ao estresse, o tônus vascular e o comportamento de células imunes, conectando-o a processos como inflamação e homeostase metabólica. A sinalização desregulada de NPY tem sido estudada em contextos que incluem obesidade e doença metabólica, fenótipos relacionados à ansiedade e ao estresse, e condições neurodegenerativas ou neuroinflamatórias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NPY (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NPY em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NPY, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NPY na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NPY.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NPY para a investigação da sinalização de NPY, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NPY críticos para a função NPY
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NPY para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NPY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NPY Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NPY. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NPY Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NPY (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NPY para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NPY definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.