Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Notch 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421934
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Notch 4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Notch 4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Notch 4 Anticorpo (A-12): sc-393893
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Notch 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421934 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Notch4 codifica um receptor transmembranar de passagem única da família Notch que medeia a sinalização dependente de contato, controlando decisões de destino celular, proliferação e diferenciação. Após a ligação de ligantes do tipo Delta ou de proteínas Jagged, a proteólise do receptor libera o domínio intracelular de Notch, que passa a regular programas de transcrição em coordenação com RBPJ/CSL e coativadores. Em tecidos de camundongo, o Notch4 está fortemente ligado à biologia vascular e endotelial, influenciando o comportamento angiogênico e a maturação dos vasos por meio de interação com vias como VEGF, Wnt e TGF-β. A desregulação da sinalização de Notch4 tem sido associada a remodelamento vascular aberrante e à angiogênese associada a tumores, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de redes de sinalização no desenvolvimento e em doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Notch 4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Notch4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Notch4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Notch4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Notch 4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Notch4 para a investigação da sinalização de Notch 4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Notch4 críticos para a função Notch 4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Notch4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Notch 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Notch 4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Notch4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Notch 4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Notch 4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Notch4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Notch4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.