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NOS2/iNOS Lentiviral Activation Particles (m) | sc-421928-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
NOS2/iNOS Lentiviral Activation Particles (m2) | sc-421928-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
Nos2は誘導型一酸化窒素合成酵素(NOS2/iNOS)をコードしており、炎症反応および自然免疫応答の過程でL-アルギニンから一酸化窒素(NO)を産生する酵素である。iNOS由来のNOは、レドックスシグナル伝達、抗微生物防御、サイトカインネットワークを調節し、マクロファージやその他の活性化細胞におけるNF-κB、JAK/STAT、MAPKによって制御される転写プログラムと交差する。Nos2活性の変化は、炎症、感染、酸化ストレスのモデルにおいて機序の指標として広く用いられており、NOおよび反応性窒素種が細胞代謝、ミトコンドリア機能、組織リモデリングに影響する。iNOSシグナルの破綻は、自己免疫、神経炎症、心血管機能障害、腫瘍関連の免疫調節に関連する実験系で示唆されている。
NOS2/iNOS レンチウイルス活性化粒子(m)は、完全な相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なNos2の発現上昇を可能にします。
NOS2/iNOS レンチウイルス活性化粒子(m)は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター(SAM)システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9(D10AおよびN863A変異)をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの;および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Nos2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性NOS2/iNOSの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のNos2ゲノム座および制御機構を維持します。
レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。