Nop25 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408434-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nop25O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nop25 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nop25 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOL12. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nop25 Anticorpo (E-2): sc-374257
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nop25 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nop25 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O NOL12 humano codifica a proteína nucleolar Nop25, um fator conservado implicado no metabolismo de RNA e na homeostase do nucléolo. A Nop25 tem sido associada ao processamento e à maturação do RNA ribossômico, ligando-a à biogênese de ribossomos e à coordenação de respostas ao estresse nucleolar. Por meio desses processos, o NOL12 pode influenciar a capacidade translacional global e programas de crescimento acoplados ao ciclo celular que dependem da produção eficiente de rRNA. Alterações na função nucleolar e vias desreguladas de processamento de RNA envolvendo o NOL12 são frequentemente estudadas no contexto de distúrbios proliferativos e de fenótipos de manutenção do genoma em sistemas modelo.
Nop25 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOL12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOL12. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOL12. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOL12 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.