Nociceptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421945
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nociceptin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Nociceptin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nociceptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421945 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pnoc codifica a nociceptina/orfanina FQ, um neuropeptídeo endógeno que atua como ligante do recetor semelhante ao recetor opioide 1 (OPRL1/NOP) e modula a excitabilidade neuronal e a transmissão sináptica. A sinalização da nociceptina envolve vias acopladas a Gi/o que reduzem a atividade da adenilil ciclase, regulam os efeitos mediados por cAMP/PKA e influenciam a condutância de canais iónicos e a libertação de neurotransmissores. No sistema nervoso central e em tecidos periféricos, este eixo contribui para a regulação da nociceção, da reatividade ao stress, dos circuitos de recompensa e da função neuroendócrina. A desregulação da sinalização PNOC–NOP tem sido implicada em fenótipos relevantes para o processamento da dor, comportamentos do tipo ansiedade e depressão, neuroadaptações relacionadas com o uso de substâncias e modulação inflamatória.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nociceptin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pnoc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pnoc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pnoc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nociceptin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pnoc para a investigação da sinalização de Nociceptin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pnoc críticos para a função Nociceptin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pnoc para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Nociceptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nociceptin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pnoc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Nociceptin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nociceptin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pnoc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pnoc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.