Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NNT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421922
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NNT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NNT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NNT Anticorpo (B-3): sc-390236
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NNT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421922 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Nnt de camundongo codifica a transidrogenase de nucleotídeos de nicotinamida (NNT), uma enzima da membrana interna mitocondrial que acopla a força próton-motriz à transferência de hidreto entre NAD(H) e NADP(H). Ao gerar NADPH mitocondrial, a NNT sustenta sistemas antioxidantes dependentes de glutationa e tiorredoxina e ajuda a manter a homeostase redox durante a fosforilação oxidativa. A atividade da NNT influencia o metabolismo mitocondrial, o manejo de espécies reativas de oxigênio e a suscetibilidade à disfunção induzida por estresse oxidativo. Alterações na função de Nnt/NNT têm sido associadas a fenótipos metabólicos e a respostas ao estresse prejudicadas, tornando-a relevante para estudos de bioenergética mitocondrial e de sinalização regulada por redox.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NNT (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nnt em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nnt, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nnt na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NNT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nnt para a investigação da sinalização de NNT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nnt críticos para a função NNT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nnt para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NNT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NNT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nnt. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NNT Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NNT (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nnt para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nnt definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.