Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NIPBL Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427895-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NIPBLO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NIPBL (m) e o Plasmídeo Double Nickase NIPBL (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nipbl. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NIPBL Anticorpo (C-9): sc-374625
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NIPBL Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427895-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NIPBL Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427895-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nipbl codifica a NIPBL, um fator de carregamento de coesina que coordena a coesão entre cromátides-irmãs e a organização da cromatina em níveis superiores ao longo do ciclo celular. Em células de camundongo, a NIPBL sustenta a comunicação de longo alcance entre enhancers e promotores e programas de controle transcricional que governam o desenvolvimento embrionário, a especificação de linhagem e as respostas a danos no DNA. A desregulação de Nipbl perturba a arquitetura genômica dependente de coesina e pode influenciar a sinalização de estresse replicativo, a segregação cromossômica e redes de expressão gênica. Como a alteração da função de NIPBL está ligada à desregulação de genes do desenvolvimento e a defeitos na estabilidade do genoma, ela é um alvo útil para estudar coesinopatias e mecanismos de doenças associadas à cromatina em modelos in vivo e in vitro.
NIPBL O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nipbl em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nipbl. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nipbl. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nipbl interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.