NFXL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407389

Visão geral

NFXL1 codifica um regulador transcricional contendo dedos de zinco, implicado no controle de programas de expressão gênica ligados à diferenciação celular e à sinalização responsiva ao estresse. Como um fator putativo de ligação ao DNA, espera-se que o NFXL1 influencie redes transcricionais que moldam processos epiteliais e relacionados ao sistema imune, incluindo vias que regulam o tônus inflamatório e a função de barreira. Estudos genéticos e funcionais em humanos associaram o NFXL1 a fenótipos do neurodesenvolvimento, sustentando sua relevância para investigar a regulação gênica no contexto do desenvolvimento cerebral e da função cognitiva. A dissecação dos resultados transcricionais dependentes de NFXL1 pode ajudar a esclarecer alvos a jusante e a comunicação cruzada entre vias que contribuem para estados de expressão associados a doenças complexas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NFXL1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NFXL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NFXL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NFXL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NFXL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NFXL1 para a investigação da sinalização de NFXL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NFXL1 críticos para a função NFXL1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NFXL1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NFXL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NFXL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NFXL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NFXL1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NFXL1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NFXL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NFXL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.