NFXL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407389

概要

NFXL1は、亜鉛フィンガーを含む転写調節因子をコードしており、細胞分化やストレス応答性シグナル伝達に関連する遺伝子発現プログラムの制御に関与すると考えられています。DNA結合因子候補として、NFXL1は、炎症のトーンやバリア機能を司る経路を含む、上皮および免疫関連プロセスを形作る転写ネットワークに影響を与えることが予想されます。ヒトにおける遺伝学的研究および機能解析では、NFXL1が神経発達に関わる表現型と関連づけられており、脳発達や認知機能という文脈で遺伝子制御を検討するうえでの重要性が示されています。NFXL1依存的な転写出力を解析することで、複雑な疾患関連の発現状態に寄与する下流標的や経路間クロストークの解明に役立ちます。

NFXL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNFXL1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NFXL1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NFXL1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NFXL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NFXL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NFXL1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NFXL1の機能に不可欠なNFXL1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NFXL1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NFXL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNFXL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NFXL1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NFXL1 HDRプラスミド（h）および NFXL1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNFXL1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNFXL1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。