NFRκB Plasmide Double Nickase (h): sc-407203-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NFRκB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NFRκB Double Nickase Plasmid (h) e il NFRκB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NFRKB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NFRκB Antibody (A-12): sc-514977
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NFRκB Plasmide Double Nickase (h) | sc-407203-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NFRκB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407203-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFRKB (nuclear factor related to kappa-B binding protein) codifica un fattore legante il DNA, identificato originariamente grazie alle interazioni con elementi regolatori di NF-κB, ed è implicato in programmi di controllo della trascrizione legati all’organizzazione della cromatina. La proteina è stata descritta come un componente associato a complessi di rimodellamento della cromatina dipendenti da ATP, a supporto di ruoli nella regolazione dell’espressione genica, nel mantenimento del genoma e in processi nucleari accoppiati al ciclo cellulare. Attraverso i collegamenti con circuiti trascrizionali adiacenti a NF-κB, NFRKB viene studiato in contesti in cui la segnalazione infiammatoria si interseca con il rimodellamento nucleare e le risposte allo stress. La disregolazione della cromatina e gli output trascrizionali correlati a NF-κB sono frequentemente analizzati nella biologia del cancro e in modelli di malattie immuno-associate, rendendo NFRKB un nodo utile per studi meccanicistici della trascrizione e della regolazione nucleare.
NFRκB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NFRKB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NFRKB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NFRKB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NFRKB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.