非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
NFKBIA/IkB alpha双切口酶质粒(m): sc-421878-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NFKBIA/IkB alpha 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- NFKBIA/IkB alpha双切酶质粒（m）和NFKBIA/IkB alpha双切酶质粒（m2）编码针对Nfkbia的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NFKBIA/IkB alpha: sc-1643，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NFKBIA/IkB alpha双切口酶质粒(m) | sc-421878-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Nfkbia 基因编码 NFKBIA/IκBα，这是一种位于细胞质的抑制蛋白，可与 NF-κB 二聚体（包括 RELA/p50）结合，并在基础状态下将其滞留在细胞核外。受到炎症或应激信号刺激时，IKK 依赖性磷酸化会触发 IκBα 的泛素化并经蛋白酶体降解，从而允许 NF-κB 转位入核并转录调控细胞因子、生存因子以及反馈调节因子。该蛋白是经典 NF-κB 信号通路的核心组成部分，并与 TNF、IL-1、TLR 及抗原受体等通路发生交叉，进而塑造先天与适应性免疫反应。Nfkbia 功能失调或 IκBα 周转异常与炎症反应失衡、免疫细胞活化状态异常，以及 NF-κB 活性持续被激活的肿瘤相关信号背景有关。
NFKBIA/IkB alpha 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Nfkbia 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nfkbia内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Nfkbia的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Nfkbia基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。