NFATc2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400422

概要

NFATC2は、カルシウム／カルシニューリンによって制御される転写因子NFATc2をコードしており、T細胞受容体シグナル伝達やその他の免疫受容体経路の下流で、遺伝子発現プログラムを統合的に調整します。脱リン酸化を受けるとNFATc2は核内へ移行し、AP-1などの共因子と協調して、サイトカイン産生、活性化誘導性の分化、免疫寛容を制御します。NFATc2活性はCa²⁺シグナルをMAPKおよびNF-κBとのクロストークと結び付け、リンパ球の増殖やエフェクター機能を形作ります。NFATC2シグナルの破綻は炎症性および自己免疫性の表現型に関与するとされ、腫瘍—免疫相互作用や、がん生物学における異常な転写状態での役割についても研究されています。

NFATc2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNFATC2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NFATC2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NFATC2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NFATc2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NFATc2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NFATC2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NFATc2の機能に不可欠なNFATC2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NFATC2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NFATc2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNFATc2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NFATC2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NFATc2 HDRプラスミド（h）および NFATc2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNFATC2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNFATC2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。