Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NF-L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402254-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NF-LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NF-L (h) e o Plasmídeo Double Nickase NF-L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NEFL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NF-L Anticorpo (8A1): sc-20012
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NF-L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402254-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NF-L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402254-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEFL codifica a cadeia leve de neurofilamento (NF-L), uma proteína central de filamento intermédio que se monta com NEFM e NEFH para formar neurofilamentos que determinam o calibre axonal e sustentam o transporte axonal a longa distância. A NF-L integra-se em processos de remodelação do citoesqueleto que coordenam o tráfego dependente de microtúbulos e de actina, influenciando a morfologia neuronal, as propriedades de condução e a resiliência estrutural. A desregulação da expressão de NEFL, da sua montagem ou da dinâmica dos filamentos dependente de fosforilação está associada a axonopatia e a fenótipos neurodegenerativos, tornando a NF-L um marcador molecular amplamente utilizado de lesão neuronal e de stress do citoesqueleto. Em sistemas neurais humanos, o NEFL é frequentemente estudado em vias que regulam o crescimento de neuritos, a manutenção sináptica e as respostas a perturbações da proteostase.
NF-L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NEFL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NEFL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NEFL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NEFL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.