Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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NF-1X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421875
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NF-1X O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NF-1X, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NF-1 Anticorpo (D-2): sc-74444
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NF-1X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421875 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nfix codifica o fator nuclear I do tipo X (NF-1X), um fator de transcrição com ligação específica ao DNA que reconhece elementos de consenso NFI para regular a atividade de promotores e enhancers durante o desenvolvimento. Em camundongos, o NF-1X contribui para a especificação de linhagens e para programas de maturação no sistema nervoso e no músculo esquelético, influenciando a saída do ciclo celular, a diferenciação e a expressão de genes associados à matriz extracelular. Fatores da família NF-1 interagem com redes de remodelamento de cromatina e de co-reguladores transcricionais para coordenar o timing do desenvolvimento e a arquitetura dos tecidos. A desregulação da função de NFIX tem sido associada a síndromes do desenvolvimento e a fenótipos alterados de crescimento e diferenciação, tornando o Nfix um nó útil para o estudo de circuitos de regulação gênica relevantes para o neurodesenvolvimento e a miogênese.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NF-1X (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nfix em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nfix, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nfix na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NF-1X.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nfix para a investigação da sinalização de NF-1X, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nfix críticos para a função NF-1X
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nfix para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NF-1X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NF-1X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nfix. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NF-1X Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NF-1X (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nfix para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nfix definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.