Neurogenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419234

概要

マウスNeurog3は、塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型転写因子であるNeurogenin 3をコードしており、発生過程の膵臓および腸管における内分泌系譜の指定を決定づける重要な因子です。Neurogenin 3は、Notch/Hesを介した抑制や内分泌化を促進する転写カスケードなど、発生シグナルからの入力を統合し、内分泌前駆細胞のコミットメント（運命決定）と、それに続く分化プログラムを駆動します。その活性は、細胞運命決定、成熟、ホルモン産生細胞としてのアイデンティティを制御する遺伝子制御ネットワークを協調的に調節するため、Neurog3は膵発生および内分泌細胞生物学の研究における中心的なノードとなっています。Neurog3機能の破綻は、内分泌分化の障害や、膵島形成に関わる代謝疾患メカニズムを扱うモデルとも関連しています。

Neurogenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNeurog3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Neurog3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Neurog3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Neurogenin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Neurogenin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Neurog3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Neurogenin 3の機能に不可欠なNeurog3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Neurog3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Neurogenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNeurogenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Neurog3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Neurogenin 3 HDRプラスミド（m）および Neurogenin 3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNeurog3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNeurog3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。