Neurogenin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419233
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Neurogenin 2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Neurogenin 2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Neurogenin 2 Anticorpo (2A8): sc-293430
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Neurogenin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419233 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Neurog2 codifica o fator de transcrição básico hélice–alça–hélice (bHLH) Neurogenina 2, um regulador mestre do comprometimento com a linhagem neuronal durante o desenvolvimento embrionário de camundongos. A Neurogenina 2 aciona programas de expressão de genes proneurais e coordena a saída do ciclo celular, a diferenciação neuronal e a migração por meio de redes transcricionais que interagem com a sinalização Notch e com fatores bHLH a jusante. Ela é essencial para a especificação de múltiplos subtipos neuronais no desenvolvimento dos sistemas nervoso central e periférico e para o controle temporal da neurogênese. Programas dependentes de NEUROG2 desregulados têm sido implicados em fenótipos do neurodesenvolvimento e em estados alterados de diferenciação neuronal relevantes para a modelagem de transtornos do desenvolvimento cerebral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Neurog2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Neurog2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Neurog2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Neurogenin 2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Neurog2 para a investigação da sinalização de Neurogenin 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Neurog2 críticos para a função Neurogenin 2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Neurog2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Neurogenin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Neurogenin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Neurog2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Neurogenin 2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Neurogenin 2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Neurog2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Neurog2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.