neurexin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406719

概要

NRXN3は、シナプス前部に存在する細胞接着分子であるネurexin III（ニューレキシンIII）をコードしており、ニューロリギン（neuroligin）などのシナプス後部パートナーや他のシナプス足場タンパク質と結合することで、シナプス形成および維持を組織化します。こうしたシナプス間（トランスシナプス）相互作用を通じて、ニューレキシンIIIは神経伝達物質放出確率、シナプスの仕様決定、ならびに神経回路機能を形作る活動依存的な再構築の制御に寄与します。NRXN3は、シナプス小胞のエキソサイトーシス、カルシウム依存性シグナル伝達、発達期から成熟期に至るネットワーク全体の興奮性／抑制性バランスを制御する経路に関与します。NRXN3の遺伝的多様性や発現変化は、神経発達および神経精神疾患に関連する表現型と関連づけられており、シナプス結合性や回路レベルの機能不全の機構解明研究における有用性を裏付けています。

neurexin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNRXN3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NRXN3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NRXN3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、neurexin IIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、neurexin IIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NRXN3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• neurexin IIIの機能に不可欠なNRXN3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NRXN3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• neurexin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびneurexin III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NRXN3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  neurexin III HDRプラスミド（h）および neurexin III HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNRXN3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNRXN3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。