NEPH3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406190

개요

KIRREL2는 면역글로불린 슈퍼패밀리(IGSF)에 속하는 접착 분자인 NEPH3를 암호화하며, 세포–세포 접합부 중에서도 특수화된 접합 부위에 풍부하게 존재해 슬릿 다이어프램(slit diaphragm) 유사 구조의 형성과 유지, 그리고 상피 장벽 조직화를 지지합니다. NEPH3는 액틴 역학과 접합 복합체의 안정성을 조율하는 스캐폴드 단백질들과의 상호작용을 통해, 접촉 의존적 신호전달과 세포골격 재구성에 관여합니다. 신장과 관련된 맥락에서 NEPH3 연관 복합체는 족세포(podocyte) 구조, 여과 장벽의 완전성, 그리고 기계적 또는 염증성 스트레스에 대한 세포 반응과 연결되어 있습니다. NEPH 계열 접착 네트워크의 조절 이상은 사구체 병리 및 변형된 상피 분화와 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 따라서 KIRREL2는 접합부 신호전달과 조직 항상성을 연구하는 데 유용한 표적입니다.

NEPH3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KIRREL2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KIRREL2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KIRREL2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NEPH3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NEPH3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KIRREL2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NEPH3 기능에 중요한 KIRREL2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KIRREL2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NEPH3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NEPH3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KIRREL2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NEPH3 HDR 플라스미드 (h) 및 NEPH3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KIRREL2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KIRREL2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.