Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NEDD8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417924-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NEDD8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NEDD8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NEDD8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NEDD8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NEDD8 Anticorpo (H-2): sc-373741
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NEDD8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417924-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEDD8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417924-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O NEDD8 codifica um modificador do tipo ubiquitina que é conjugado covalentemente a substratos na via de neddilação, sobretudo a proteínas da família cullin, que atuam como arcabouço das ligases E3 de ubiquitina do tipo cullin–RING. A conjugação de NEDD8 regula o turnover proteico, a progressão do ciclo celular, a replicação e o reparo do DNA e a sinalização de estresse ao modular a atividade das CRLs e a proteostase a jusante dependente de ubiquitina. A perturbação da neddilação altera o controle de checkpoints, a estabilidade genômica e programas transcricionais, relacionando a desregulação da via de NEDD8 a fenótipos proliferativos e à reprogramação de vias de sinalização observadas em diversos contextos de doença. Como um nó central em modificações pós-traducionais do tipo ubiquitina, o NEDD8 é amplamente estudado em proteômica, mapeamento de vias e triagens de genômica funcional.
NEDD8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NEDD8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NEDD8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NEDD8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NEDD8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.