Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NEDD4-L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403647-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NEDD4-LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NEDD4-L (h) e o Plasmídeo Double Nickase NEDD4-L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NEDD4L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NEDD4-L Anticorpo (C-8): sc-514954
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NEDD4-L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403647-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEDD4-L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403647-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEDD4L codifica a NEDD4-L, uma ligase E3 de ubiquitina com domínio HECT que regula o turnover proteico e a abundância de proteínas de membrana ao catalisar a conjugação de ubiquitina a substratos específicos. É um modulador-chave do tráfego do canal epitelial de sódio (ENaC) e da homeostase iónica, e também se cruza com vias de sinalização de crescimento e stress através do controlo, dependente de ubiquitina, de componentes dessas vias. A NEDD4-L tem sido implicada na regulação da sinalização TGF-β/SMAD, dos outputs da via Wnt e de respostas celulares que moldam programas de proliferação e diferenciação. A desregulação da expressão ou da atividade de NEDD4L está associada a alterações da fisiologia do transporte epitelial e foi relatada em estudos de biologia do cancro e de características cardiometabólicas, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico na investigação da sinalização por ubiquitina.
NEDD4-L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NEDD4L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NEDD4L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NEDD4L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NEDD4L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.