Nectin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401994-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nectin 2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nectin 2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nectin 2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NECTIN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nectin 2 Anticorpo (E-1): sc-271236
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nectin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nectin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NECTIN2 codifica a nectina-2 (CD112), uma molécula de adesão celular do tipo imunoglobulina localizada nas junções aderentes, onde coordena contactos célula–célula independentes de Ca2+, a polaridade epitelial e a organização do citoesqueleto através da afadina e de interações cruzadas com complexos caderina–catenina. A nectina-2 participa na montagem das junções, na migração e na morfogénese dos tecidos, e também funciona como ligando para recetores imunitários como TIGIT, CD226 (DNAM-1) e CD96, ligando a biologia da adesão ao reconhecimento imunitário. Alterações na expressão de NECTIN2 têm sido descritas em contextos inflamatórios e oncogénicos e são estudadas pelo seu impacto nas interações tumor–sistema imunitário, no comportamento metastático e na integridade da barreira. Estas propriedades fazem de NECTIN2 um nó útil para dissecar vias que governam a sinalização dependente de adesão, a modulação de checkpoints imunitários e as dinâmicas epitélio–mesênquima.
Nectin 2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NECTIN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NECTIN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NECTIN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NECTIN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.