Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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NDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402716
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NDR1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NDR1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NDR1 Anticorpo (A-8): sc-365555
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402716 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
STK38 codifica a quinase serina/treonina NDR1, uma quinase da família AGC que atua a jusante de MST1/2 em sinalização relacionada à via Hippo para regular a progressão do ciclo celular, a biologia do centrossomo, a apoptose e a organização do citoesqueleto. A atividade de NDR1 é controlada por fosforilação e pela ligação a cofatores (incluindo proteínas MOB), conectando sinais a montante de estresse e polaridade a desfechos transcricionais e estruturais. Por suas funções no controle mitótico, em respostas associadas a dano no DNA e na homeostase epitelial, STK38/NDR1 tem sido estudado em contextos relevantes para biologia tumoral, neurobiologia e sinalização relacionada à inflamação. A perturbação de vias dependentes de NDR1 pode influenciar fenótipos de proliferação, sobrevivência e migração, comumente investigados em modelos mecanísticos de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NDR1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STK38 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STK38, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STK38 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NDR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STK38 para a investigação da sinalização de NDR1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STK38 críticos para a função NDR1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STK38 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NDR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STK38. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NDR1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NDR1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STK38 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STK38 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.