Nap-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437379

概要

Nap-22（BASP1としても知られる）は、神経細胞に豊富に発現する膜関連タンパク質であり、形質膜上でリン脂質やシグナル伝達複合体と相互作用することを通じて、軸索成長、神経突起伸長、シナプス機能の制御に関与するとされています。また、活動依存的な神経可塑性に関与し、成長円錐のダイナミクスを形成する細胞骨格の編成や小胞輸送プロセスとの関連も示唆されています。さらにNap-22は、核内での相互作用を介した転写制御の文脈でも研究されており、細胞外からの刺激を神経分化に関わる遺伝子発現プログラムへと結び付ける役割が示されています。Nap-22の発現量や局在の変化は、膜シグナル伝達やシナプス再構築が障害される神経発達・神経変性領域の研究において関連づけて報告されています。

Nap-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nap-22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nap-22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nap-22の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nap-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびNap-22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nap-22 HDRプラスミド（r）および Nap-22 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。