NanogNB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418788

Visão geral

NANOGNB (NanogNB) é um gene humano relacionado ao NANOG, implicado em programas regulatórios associados à pluripotência e à expressão gênica nos estágios iniciais do desenvolvimento. Como um parálogo/fator relacionado aos circuitos centrais de “stemness”, o NanogNB é estudado no contexto do controle transcricional, da especificação do destino celular e da manutenção do estado epigenético, com potencial interação com vias que regulam a autorrenovação e a diferenciação. A expressão alterada de genes da família NANOG é frequentemente avaliada em modelos de plasticidade de células tumorais, biologia de células germinativas e reprogramação, nos quais mudanças em redes transcricionais do tipo “stem-like” podem influenciar a proliferação e o comprometimento de linhagem. Assim, o NANOGNB serve como alvo para dissecar como a arquitetura regulatória associada ao NANOG contribui para processos do desenvolvimento e fenótipos celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NanogNB (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NANOGNB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NANOGNB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NANOGNB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NanogNB.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NANOGNB para a investigação da sinalização de NanogNB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NANOGNB críticos para a função NanogNB
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NANOGNB para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NanogNB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NanogNB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NANOGNB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NanogNB Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NanogNB (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NANOGNB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NANOGNB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.