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MYH9慢病毒激活颗粒(m) | sc-421784-LAC | 200 µl | $455.00 |
Myh9 编码非肌肉肌球蛋白 IIA(MYH9),这是一种依赖肌动蛋白的马达蛋白,能够在小鼠细胞中产生收缩力并维持细胞骨架的组织结构。MYH9 通过协调肌动蛋白-肌球蛋白(actomyosin)重塑、应力纤维形成以及力学信号转导,调控黏附动态、细胞极性与迁移,并进一步影响细胞质分裂、上皮屏障完整性等过程。通过与 RhoA/ROCK 信号通路、黏着斑组分以及膜运输机制相互作用,MYH9 有助于将机械刺激与细胞形态变化及基因表达程序的改变耦联起来。MYH9 活性异常与造血系统和肾脏生物学缺陷相关,并在血小板减少、肾小球功能障碍以及与细胞骨架相关的发育表型等研究中被广泛关注。
MYH9 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Myh9 表达。
MYH9 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Myh9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MYH9表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Myh9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。