MYH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400467-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MYH4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MYH4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MYH4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MYH4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MYH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYH4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH4 codifica a cadeia pesada de miosina 4, uma proteína motora contrátil do músculo esquelético de contração rápida que forma a espinha dorsal dos filamentos espessos e converte a hidrólise de ATP em geração de força ao longo da actina. Sua interação regulada com as cadeias leves de miosina e com proteínas estruturais sarcoméricas sustenta o ciclo de pontes cruzadas, a organização das miofibrilas e a contratilidade específica de tipos de fibra muscular. A expressão de MYH4 contribui para vias que controlam a montagem do sarcômero, o acoplamento excitação–contração e a especialização metabólica de fibras rápidas glicolíticas. A desregulação da composição das cadeias pesadas de miosina e da integridade sarcomérica é relevante para estudos de fraqueza do músculo esquelético, remodelamento e fenótipos miopáticos em sistemas humanos.
MYH4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MYH4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MYH4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MYH4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MYH4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.