Mx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421763
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mx1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mx1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mx1 Anticorpo (E-5): sc-271024
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421763 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mx1 (myxovirus resistance 1) codifica uma GTPase induzida por interferon, semelhante à dinamina, que atua como um efetor-chave da resposta antiviral inata em células de camundongo. Após a sinalização por interferons do tipo I e do tipo III via a via JAK–STAT, Mx1 é induzido transcricionalmente e pode restringir a replicação de diversos vírus de RNA ao interferir no tráfego do nucleocapsídeo viral e na formação de complexos de replicação. A atividade de Mx1 se integra a redes mais amplas de genes estimulados por interferon (ISGs) que modulam a sinalização inflamatória, a apresentação de antígenos e a imunidade intrínseca celular. A variação na restrição dependente de Mx1 tem sido explorada para estudar a suscetibilidade do hospedeiro à infecção viral, a imunopatologia mediada por interferon e mecanismos de evasão imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mx1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mx1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mx1 para a investigação da sinalização de Mx1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mx1 críticos para a função Mx1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mx1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mx1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mx1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mx1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.