musculin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403242
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- musculin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico musculin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:musculin Anticorpo (4D7): sc-293482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
musculin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403242 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **MSC** codifica a musculina, um fator de transcrição do tipo hélice–alça–hélice básica (bHLH) que modula programas de expressão gênica responsáveis pela especificação de linhagens ao se ligar a motivos E-box e cooperar com outros reguladores bHLH. A musculina está implicada no controle de decisões de destino celular, no timing de diferenciação e na dinâmica de repressão/ativação transcricional em contextos do desenvolvimento e específicos de tecidos, com efeitos a jusante sobre a proliferação e a estabilidade fenotípica. Alterações na expressão de **MSC** foram relatadas em diversos cenários relevantes para doenças, incluindo reprogramação transcricional associada ao câncer e mudanças no estado de diferenciação, tornando-o um nó útil para o estudo de redes regulatórias gênicas. A investigação funcional da musculina ajuda a esclarecer como circuitos dirigidos por bHLH se conectam a vias que governam o controle do crescimento e a identidade celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO musculin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MSC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MSC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MSC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína musculin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MSC para a investigação da sinalização de musculin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MSC críticos para a função musculin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MSC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo musculin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo musculin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MSC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo musculin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR musculin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MSC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MSC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.