Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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mTOR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400140-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mTORO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mTOR (h) e o Plasmídeo Double Nickase mTOR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MTOR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p-mTOR Anticorpo (59.Ser 2448): sc-293133
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mTOR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400140-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mTOR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400140-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MTOR codifica a quinase de serina/treonina mTOR, um integrador central de sinais provenientes de fatores de crescimento, nutrientes, energia e estresse, que coordena o metabolismo e a homeostase celulares. A mTOR atua nos complexos mTORC1 e mTORC2 para regular a síntese proteica e o crescimento celular por meio de S6K e 4E-BP1, a autofagia via sinalização de ULK1, e a organização do citoesqueleto e sinais de sobrevivência pelas vias de AKT e SGK. A desregulação da sinalização de mTOR está implicada em proliferação alterada e reprogramação metabólica na biologia do câncer, e contribui para fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, bem como para disfunção cardiometabólica. Como a mTOR se encontra no ponto de convergência das vias PI3K–AKT–mTOR e AMPK, a perturbação de MTOR é amplamente utilizada para investigar o crosstalk entre vias, respostas ao estresse e controle traducional.
mTOR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MTOR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MTOR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MTOR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MTOR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.