MTDH Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-413927-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- MTDH as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- MTDH As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo MTDH Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo MTDH Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor MTDH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: MTDH Anticorpo (2F11C3D4): sc-517220
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MTDH Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-413927-LAC | 200 µl | $455.00 |
O MTDH humano (metadherina/AEG-1) codifica uma proteína multifuncional do tipo “scaffold” que coordena programas transcricionais e pós-transcricionais ligados à sobrevivência celular, inflamação e adaptação ao stress. O MTDH tem sido implicado na modulação das vias de sinalização NF-κB e PI3K/AKT, na regulação da transição epitélio–mesênquima e no controlo do metabolismo de RNA por meio de interações com complexos ribonucleoproteicos. A expressão alterada de MTDH está associada a fenótipos tumorais agressivos, incluindo aumento de invasão, metastização e resistência a terapias, e também é estudada no contexto de neuroinflamação e desregulação metabólica. Essas propriedades tornam o MTDH um nó relevante para dissecar redes de sinalização oncogénica, circuitos de regulação génica e vias de resposta ao microambiente em modelos celulares humanos.
As Partículas de Ativação Lentivirais MTDH (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de MTDH numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais MTDH (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição MTDH, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de MTDH. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo MTDH e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.