MRP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402443
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MRP5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP5 Anticorpo (E-10): sc-376965
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402443 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ABCC5 codifica o transportador humano da família ATP-binding cassette MRP5 (ABCC5), uma bomba de efluxo de membrana que utiliza a hidrólise de ATP para exportar uma variedade de ânions orgânicos, incluindo nucleótidos cíclicos como o cGMP, e outros metabolitos que influenciam a sinalização intracelular. Ao regular os níveis citosólicos de nucleótidos e o processamento de xenobióticos, a MRP5 relaciona-se com processos associados ao transporte de membrana, ao equilíbrio redox e às respostas celulares ao stress. Alterações na atividade de ABCC5/MRP5 têm sido associadas a mudanças em fenótipos de disposição de fármacos e a programas relevantes para doenças envolvendo proliferação e sobrevivência em múltiplos contextos tecidulares. Como resultado, o ABCC5 é frequentemente estudado em vias que ligam a homeostase mediada por transporte à regulação do estado celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRP5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ABCC5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ABCC5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ABCC5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRP5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ABCC5 para a investigação da sinalização de MRP5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ABCC5 críticos para a função MRP5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ABCC5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MRP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MRP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ABCC5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MRP5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MRP5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ABCC5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ABCC5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.