MOG CRISPR Activationプラスミド (h): sc-402717-ACT

ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（MOG）は、中枢神経系（CNS）のミエリン表面タンパク質であり、オリゴデンドロサイトの突起およびミエリン鞘の最外層ラメラに豊富に存在する。これにより、ミエリンの完全性や軸索—グリア相互作用に寄与している。ミエリン区画において高いアクセス性をもつ膜抗原として、MOGはCNSミエリンに対する免疫認識や、脱髄および再髄鞘化を制御する機構の解析に広く用いられている。MOGに向けられた免疫応答の変化や、ミエリン関連遺伝子プログラムの変動は、炎症性脱髄疾患や神経炎症性病態と関連しており、オリゴデンドロサイト生物学、抗原提示、白質損傷の研究におけるMOGの有用性を支持する。実験的にMOG発現を調節することは、ミエリン維持、ミクログリア活性化、神経—免疫クロストークを司る経路の切り分けに役立つ。

MOG CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性MOGの発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

MOG CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における MOG 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はMOG転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性MOGの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のMOG遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるMOG依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびMOG発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるMOG経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。