MGC29506 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406694

Visão geral

MZB1 (também conhecido como MGC29506) codifica uma proteína luminal do retículo endoplasmático, enriquecida em células da linhagem B, que dá suporte à diferenciação de plasmócitos e à biossíntese de imunoglobulinas. Atua como uma co-chaperona na rede de proteostase do RE, coordenando o dobramento oxidativo e o controle de qualidade por meio de interações com os sistemas de chaperonas GRP94/HSP90B1 e BiP/HSPA5, além de contribuir para a sinalização de estresse do RE e da resposta a proteínas mal dobradas (UPR). Ao modular a capacidade da via secretória e o manejo de proteínas mal dobradas, MZB1 influencia programas de secreção de anticorpos e a homeostase de células B. A expressão desregulada tem sido associada a estados anormais de plasmócitos e a fisiopatologia relacionada ao sistema imune, tornando-o relevante para estudos sobre maturação de células B, adaptação ao estresse do RE e biologia de células secretoras.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MGC29506 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MZB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MZB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MZB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MGC29506.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MZB1 para a investigação da sinalização de MGC29506, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MZB1 críticos para a função MGC29506
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MZB1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MGC29506 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MGC29506 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MZB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MGC29506 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MGC29506 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MZB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MZB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.