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Mfn2/Mitofusin 2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400536-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
Mfn2/Mitofusin 2慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400536-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
MFN2 编码线粒体融合蛋白 2(mitofusin 2,Mfn2),这是一种定位于线粒体外膜的类 dynamin GTP 酶,介导线粒体融合并帮助维持线粒体网络结构。除融合功能外,Mfn2 还参与线粒体–内质网接触位点的形成,影响钙离子交换、脂质转运,并协调氧化磷酸化与细胞能量需求之间的匹配。通过这些作用,MFN2 进一步影响线粒体自噬、氧化还原稳态以及应激反应信号通路,从而塑造细胞存活与代谢适应。MFN2 活性失调与神经病变及更广泛的线粒体功能障碍表型相关,因此是研究疾病相关模型中细胞器动态的一个有用靶点。
Mfn2/Mitofusin 2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MFN2 表达。
Mfn2/Mitofusin 2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MFN2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Mfn2/Mitofusin 2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MFN2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。