ME3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417146

개요

인간 ME3는 미토콘드리아 NADP 의존성 말산효소를 암호화하며, 이 효소는 말산을 피루브산으로 산화적 탈탄산화하는 과정에서 NADPH를 동시에 생성합니다. ME3는 삼카복실산(TCA) 회로를 미토콘드리아의 산화환원 조절과 연결함으로써, 생합성에 필요한 환원력 제공, 항산화 방어, 그리고 영양 조건 변화에 따른 대사 유연성을 뒷받침합니다. ME3 활성은 아니플레로시스/카타플레로시스, 활성산소(ROS) 완충, 미토콘드리아 기능에 관여하는 경로에 영향을 미치므로, 대사 재편 및 산화환원 스트레스 연구에서 중요하게 다뤄집니다. ME3 발현 변화 또는 ME3 의존성은 미토콘드리아 NADPH 균형과 산화 대사가 질병 관련 표현형에 기여하는 맥락에서 연구되어 왔으며, 여기에는 암 대사와 미토콘드리아 기능장애 등이 포함됩니다.

ME3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ME3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ME3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ME3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ME3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ME3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ME3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ME3 기능에 중요한 ME3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ME3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ME3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ME3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ME3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ME3 HDR 플라스미드 (h) 및 ME3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ME3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ME3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.