MDR3/ABCB4 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404167-LAC

ABCB4（MDR3）は、肝細胞の毛細胆管膜に存在するATP結合カセット（ABC）トランスポーターをコードしており、ホスファチジルコリンを毛細胆管膜の内側リーフレットから外側リーフレットへ移動させて胆汁中へ分泌します。胆汁酸と混合ミセルを形成するリン脂質を供給することで、MDR3は胆汁形成、膜の保護、ならびに胆汁酸輸送および脂質トラフィッキング経路における肝胆道系の脂質恒常性を支えます。ABCB4活性の欠失または低下は、胆汁うっ滞性の肝疾患表現型や胆汁組成の変化と関連しており、胆汁酸誘発性障害、炎症性シグナル伝達、トランスポーター・ネットワークの制御に関する研究において重要です。そのためABCB4は、毛細胆管膜のダイナミクスや他の肝トランスポーターとのクロストークを解析するモデルとして広く用いられています。

MDR3/ABCB4 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なABCB4の発現上昇を可能にします。

MDR3/ABCB4 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、ABCB4転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性MDR3/ABCB4の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のABCB4ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。