Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400959-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCM2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCM2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCM2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MCM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCM2 Anticorpo (E-8): sc-373702
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400959-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400959-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM2 codifica uma subunidade central do complexo helicase de manutenção de minicro-mossomos (MCM2–7), que licencia as origens de replicação do DNA e impulsiona a progressão da forquilha de replicação durante a fase S. Por meio de uma ação coordenada com CDC45 e o complexo GINS, o MCM2 dá suporte à montagem do replissoma, às respostas ao estresse replicativo e ao acoplamento da síntese de DNA à sinalização de checkpoints. A perturbação ou a expressão desregulada de MCM2 pode comprometer a estabilidade genômica, aumentar o estresse replicativo e alterar programas de controle do ciclo celular frequentemente estudados em distúrbios proliferativos. Como marcador de células em ciclo, o MCM2 é amplamente utilizado para investigar a dinâmica da replicação, os estados de licenciamento associados à cromatina e os mecanismos de tolerância a danos no DNA.
MCM2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MCM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MCM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MCM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MCM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.