MBOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406397

Visão geral

MBOAT1 (membrane bound O-acyltransferase domain containing 1) codifica uma aciltransferase associada ao retículo endoplasmático, implicada na remodelação lipídica por meio da transferência de grupos acilo de ácidos graxos para substratos hidroxilados, influenciando a composição lipídica das membranas e a homeostase lipídica celular. Ao modular o equilíbrio de lipídios bioativos e as propriedades da membrana, MBOAT1 pode afetar processos de sinalização ligados à regulação metabólica, à função de organelas e às respostas celulares ao estresse. Alterações na atividade de aciltransferases ligadas à membrana têm sido exploradas em contextos como dislipidemia, sinalização inflamatória e biologia tumoral, nos quais mudanças na composição lipídica podem remodelar vias de proliferação e sobrevivência. Assim, MBOAT1 é um alvo útil para dissecar mecanismos mediados por lipídios que conectam a remodelação de membranas a fenótipos celulares a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MBOAT1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MBOAT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MBOAT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MBOAT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MBOAT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MBOAT1 para a investigação da sinalização de MBOAT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MBOAT1 críticos para a função MBOAT1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MBOAT1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MBOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MBOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MBOAT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MBOAT1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MBOAT1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MBOAT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MBOAT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.