MAZ Double Nickaseプラスミド (h): sc-403775-NIC

MAZ（Myc関連亜鉛フィンガータンパク質）は、GCリッチなDNAに結合する転写因子で、GAボックス配列を認識し、プロモーター近傍領域におけるRNAポリメラーゼII依存的な転写を調節します。細胞周期の進行、分化プログラム、ストレス応答性遺伝子の発現制御に関与し、転写コファクターとの相互作用を介してクロマチン構造にも影響を及ぼし得ます。MAZは、MYC関連の転写ネットワークを含むがん遺伝子やサイトカインの発現制御と関連づけられており、増殖や炎症シグナル伝達の研究において重要です。MAZの活性異常や、MAZが制御するプロモーター使用の変化は複数のがんで観察されており、代謝・免疫経路における転写リプログラミングとの関連でも研究されています。

MAZ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MAZ 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MAZ内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MAZの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MAZが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。