Matrilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404852

概要

MATN2は、マトリリン-2（matrilin-2）をコードする。マトリリン-2は多ドメイン構造をもつ細胞外マトリックス（ECM）のアダプター型糖タンパク質であり、コラーゲン、プロテオグリカン、その他のマトリックス構成要素を橋渡しすることで、線維状ネットワークの組み立てと安定化に関与する。マトリリン-2は組織構築および細胞―マトリックス間コミュニケーションを支え、接着、遊走、メカノトランスダクションといった、ECMリモデリングプログラムと密接に関連する過程に影響を与える。マトリックス構造の形成における役割を通じて、MATN2は筋骨格系・結合組織生物学の研究に関連し、さらにECM組成が炎症や創傷治癒を左右するより広い文脈でも重要である。MATN2が関与するECM恒常性の破綻は、複数組織における病的リモデリングや線維化様表現型と関連づけられており、ヒト細胞モデルでの機序解明研究が促されている。

Matrilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMATN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MATN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MATN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Matrilin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Matrilin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MATN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Matrilin-2の機能に不可欠なMATN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MATN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Matrilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMatrilin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MATN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Matrilin-2 HDRプラスミド（h）および Matrilin-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMATN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMATN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。