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MATH-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-404171-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
MATH-1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-404171-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
ATOH1(MATH-1)编码一种碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,在人类发育过程中统筹谱系承诺与分化程序。MATH-1 调控控制神经发生和上皮细胞命运决定的基因网络,并与 Notch 依赖的侧向抑制、Wnt/β-连环蛋白信号以及染色质重塑相整合,从而决定祖细胞的发育结局。ATOH1 的表达或活性失调与多种组织环境中的分化状态改变及异常增殖相关,因此可作为研究“发育锚定”的转录调控回路的分子切入点。作为命运决定通路中的关键节点,ATOH1 常在神经与感觉谱系指定、上皮稳态以及由转录因子驱动的细胞身份重编程等模型中被重点研究。
MATH-1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ATOH1 表达。
MATH-1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ATOH1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MATH-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ATOH1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。