非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
肥大细胞糜蛋白酶抗体 (CC1): sc-59586. 人皮肤糜蛋白酶 (A) 和人重组糜蛋白酶 (B) 中肥大细胞糜蛋白酶表达的 Western 印迹分析. 由 Xiaoying Zhou 博士友情提供.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Mast Cell Chymase双切口酶质粒(h): sc-403686-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Mast Cell Chymase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Mast Cell Chymase双切酶质粒（h）和Mast Cell Chymase双切酶质粒（h2）编码针对CMA1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Mast Cell Chymase: sc-59586，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Mast Cell Chymase双切口酶质粒(h) | sc-403686-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mast Cell Chymase双切口酶质粒(h2) | sc-403686-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMA1 编码肥大细胞胰凝乳蛋白酶（chymase），这是一种与颗粒相关的丝氨酸蛋白酶，在肥大细胞脱颗粒过程中释放，从而塑造炎症反应与组织重塑反应。人源 chymase 通过加工多种底物（包括血管活性肽和细胞因子前体）参与细胞外基质更新与局部信号调控，进而影响血管周围微环境中的蛋白酶激活受体相关通路以及肾素–血管紧张素相关通路。chymase 活性失衡与过敏性炎症及慢性纤维化重塑过程有关，在这些过程中，肥大细胞来源的蛋白酶可调控白细胞募集、血管通透性以及基质细胞激活。因此，CMA1 常被用于研究气道与心血管生物学、纤维炎症信号网络以及肥大细胞驱动的病理机制。
Mast Cell Chymase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CMA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CMA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CMA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CMA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。