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MAPKAPK-2慢病毒激活颗粒(h) | sc-401158-LAC | 200 µl | $455.00 |
MAPKAPK2 编码 MAPKAPK-2(MK2),这是一种位于 p38 MAPK 下游、可被激活的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够磷酸化 HSPB1 等效应蛋白,并调控控制 mRNA 稳定性与翻译的 RNA 结合蛋白。通过这些底物,MK2 协调细胞对炎症性细胞因子、氧化应激和基因毒性应激的应答,进而影响细胞因子产生、细胞周期检查点、凋亡以及细胞骨架动态。MAPKAPK2 信号通路常在慢性炎症以及支持肿瘤进展、免疫调节与组织重塑的应激适应程序等背景下被研究。作为 p38–MK2 轴中的枢纽激酶,MAPKAPK-2 对解析其与 NF-κB 信号通路的串扰以及对免疫介质的转录后调控具有重要意义。
MAPKAPK-2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MAPKAPK2 表达。
MAPKAPK-2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MAPKAPK2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性MAPKAPK-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MAPKAPK2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。