MAP-1S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406495
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAP-1S O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MAP-1S, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAP-1S Anticorpo (4H2): sc-517081
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAP-1S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406495 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAP1S codifica a proteína 1S associada a microtúbulos (MAP-1S), um adaptador do citoesqueleto que conecta os microtúbulos à maquinaria de autofagia e influencia o tráfego intracelular, a dinâmica de organelas e as respostas celulares ao estresse. A MAP-1S tem sido implicada na regulação da formação de autofagossomos e no manuseio de cargas, relacionando a estabilidade dos microtúbulos com a proteostase e o controle de qualidade mitocondrial. Por meio desses processos, MAP1S contribui para respostas homeostáticas ao estresse oxidativo e a perturbações metabólicas, vias frequentemente alteradas no câncer e na neurodegeneração. Alterações na expressão ou na função de MAP1S têm sido associadas a autofagia desregulada e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia tumoral e outras patologias ligadas ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MAP-1S (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAP1S em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAP1S, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAP1S na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MAP-1S.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAP1S para a investigação da sinalização de MAP-1S, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAP1S críticos para a função MAP-1S
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAP1S para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MAP-1S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MAP-1S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAP1S. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MAP-1S Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MAP-1S (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAP1S para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAP1S definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.