Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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MAO-A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401030
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MAO-A Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico MAO-A, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MAO-A Antibody (G-10): sc-271123
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MAO-A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401030 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene umano **MAOA** codifica la monoamino ossidasi A (MAO-A) della membrana esterna mitocondriale, un enzima flavina-dipendente che catalizza la deaminazione ossidativa delle amine biogene, tra cui serotonina, noradrenalina e dopamina. Attraverso la regolazione del catabolismo delle monoamine, MAO-A influenza l’omeostasi dei neurotrasmettitori, l’equilibrio redox mitocondriale e le reti di segnalazione a valle legate alle risposte cellulari allo stress. L’attività di MAO-A contribuisce a vie che influenzano la produzione di specie reattive dell’ossigeno e il metabolismo delle aldeidi, collegando il turnover delle monoamine allo stress ossidativo e all’adattamento metabolico. Alterazioni dell’espressione o della funzione di **MAOA** sono state associate a fenotipi neuropsichiatrici e a disturbi che coinvolgono una segnalazione monoaminergica disregolata, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici in sistemi cellulari neurali e periferici.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MAO-A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MAOA in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MAOA insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MAOA a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MAO-A.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MAOA per lo studio della segnalazione di MAO-A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni MAOA critici per la funzione di MAO-A
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MAOA per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal MAO-A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MAO-A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MAOA. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal MAO-A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MAO-A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MAOA per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MAOA definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.