MAML2 Plasmide Double Nickase (m): sc-435408-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MAML2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MAML2 Double Nickase Plasmid (m) e il MAML2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Maml2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MAML2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-435408-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAML2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-435408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Maml2 codifica mastermind-like 2 (MAML2), un coattivatore trascrizionale che si associa ai complessi NICD–CSL/RBPJ per attivare programmi di espressione genica dipendenti da Notch, che regolano le decisioni di destino cellulare, la differenziazione e l’omeostasi tissutale. MAML2 integra segnali a livello dei promotori bersaglio per modulare l’output trascrizionale, influenzando proliferazione e specificazione di linea in molteplici contesti. Un’attività trascrizionale Notch–MAML deregolata è stata collegata ad anomalie dello sviluppo e a un rimodellamento trascrizionale associato al cancro, rendendo MAML2 un nodo utile per l’analisi della via di segnalazione in vivo e in vitro. Nei sistemi murini, la manipolazione di Maml2 consente studi meccanicistici sulla regolazione trascrizionale mediata da Notch, sulle relazioni di epistasi con altri componenti della via e sugli effetti sulle reti geniche a valle.
MAML2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Maml2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Maml2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Maml2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Maml2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.