Date published: 2026-7-12

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MAD2B双切口酶质粒(h2): sc-404007-NIC-2

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • MAD2B 双切口酶质粒(h2)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • MAD2B双切酶质粒(h2)和MAD2B双切酶质粒(h22)编码针对MAD2L2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:MAD2B: sc-377367,通过WB, IF或者IHC分析
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    MAD2B双切口酶质粒(h2)

    sc-404007-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    人类MAD2L2基因编码MAD2B(亦称REV7),这是一种含HORMA结构域的蛋白,通过与DNA聚合酶ζ介导的跨损伤DNA合成(TLS)协同作用,并在复制压力下协调DNA损伤耐受,从而维持基因组稳定性。MAD2B还作为Shieldin复合体的组成部分影响双链断裂修复的通路选择,促进非同源末端连接(NHEJ)并限制DNA末端切除,进而塑造细胞对基因毒性打击的应答。通过上述作用,MAD2L2参与检查点控制、复制相关修复以及染色质相关修复因子的募集等过程,而这些过程在癌症及其他与DNA修复缺陷相关的疾病中常被扰乱。围绕MAD2L2/MAD2B的研究工具可支持对诱变机制的研究、合成致死相互作用图谱绘制,以及在基因编辑与基因组维护实验中对修复通路偏好(修复偏向)的功能解析。

    MAD2B 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAD2L2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAD2L2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAD2L2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAD2L2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。