MACF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418945
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MACF1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MACF1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MACF1 Anticorpo (A-3): sc-377532
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MACF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418945 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Macf1 codifica o fator 1 de ligação cruzada entre microtúbulos e actina (MACF1), uma grande espectraplaquina que conecta mecânica e funcionalmente os microtúbulos ao citoesqueleto de actina para coordenar a polaridade celular, a migração e o tráfego intracelular. Em células de camundongo, o MACF1 sustenta a renovação das adesões focais e a remodelação do citoesqueleto, e tem sido associado à sinalização Wnt/β-catenina por meio da regulação da dinâmica do complexo de Axin, influenciando saídas de sinalização dependentes do citoesqueleto. Ao integrar as redes de actina e microtúbulos, o MACF1 contribui para o desenvolvimento neuronal, a organização dos tecidos epidérmico e intestinal e as respostas a estímulos mecânicos. A desregulação de programas citoesqueléticos associados ao MACF1 tem sido estudada em contextos como fenótipos do neurodesenvolvimento, integridade de barreiras e comportamentos migratórios do tipo metastático relevantes para modelos de biologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MACF1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Macf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Macf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Macf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MACF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Macf1 para a investigação da sinalização de MACF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Macf1 críticos para a função MACF1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Macf1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MACF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MACF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Macf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MACF1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MACF1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Macf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Macf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.